La tecnología CHIC (Competitive Heterologous Internal Control) es el sistema de control interno de amplificación desarrollado por Progenie molecular que incluyen los kits RealCycler.
Esta tecnología permite utilizar cualquier sistema de extracción sin que se produzcan pérdidas de sensibilidad, y a la vez monitorizar con precisión una eventual inhibición de la muestra. Por ello, los kits RealCycler Monotest y RealCycler Universal son compatibles prácticamente con todos los sistemas de extracción de ADN/ARN disponibles en el mercado, sin realizar modificaciones en los protocolos originales proporcionados por el fabricante.
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Resultado:
- La señal del CHIC se detecta en el canal HEX (línea verde) con un Ct = 31,75
- El rango de aceptación del CHIC es Ct < 35. Por tanto, en este caso se encuentra dentro del mismo.
- La señal del patógeno en el canal FAM (línea azul) es plana y no marca Ct (no se detecta).
Interpretación:
Esta muestra no presenta inhibición, por lo que el resultado es claramente NEGATIVO.
Este tipo de señal se observa al utilizar agua como control negativo o muestras que presentan una ausencia absoluta de inhibidores.
Resultado:
- La señal del control CHIC se detecta en el canal HEX (línea verde) con un Ct = 33,98
- El rango de aceptación del CHIC es Ct < 35. Por tanto, en este caso se encuentra dentro del mismo.
- La señal del patógeno en el canal FAM (línea azul) es plana y no marca Ct (no se detecta).
Interpretación:
La reacción no está inhibida ya que el CHIC da dentro de rango, por lo que el resultado de la muestra es NEGATIVO.
El valor del Ct de CHIC es más alto que en el caso anterior, lo que indica una inhibición parcial de la PCR. No obstante dado que se encuentra dentro del rango de aceptación el resultado puede aceptarse.
Resultado:
- La señal del patógeno se detecta en el canal FAM (línea azul) con un Ct = 30,78
- El valor del Ct CHIC = 31,1 (linea verde). Dado que hay señal en el canal FAM del patógeno, el valor de Ct CHIC es indiferente.
Interpretación:
Muestra positiva (linea azul).
La señal de CHIC se detecta en el canal HEX (línea verde) con un Ct = 31,4 (dentro del rango de aceptación). Esto indica que no se ha producido competencia entre CHIC y el patógeno, y sugiere que el patógeno se encuentra en baja concentración.
Resultado:
- La señal del patógeno se detecta en el canal FAM (línea azul) con un Ct = 27,68.
Interpretación:
Muestra positiva (independientemente del valor del CHIC).
La señal del CHIC se detecta en el canal HEX (línea verde) con un Ct = 36,38. Aunque se encuentra fuera del rango de aceptación, no indica inhibición, sino competencia entre el patógeno y el CHIC. En este caso CHIC se ha desplazado por estar en desventaja competitiva.
Resultado:
- La señal del patógeno se detecta en el canal FAM (línea azul) con un Ct = 24,55.
Interpretación:
Muestra positiva (independientemente del valor del CHIC).
La señal del CHIC se detecta en el canal HEX (línea verde plana). No marca Ct, lo que indica que se ha producido competencia entre el patógeno y el CHIC, y que el CHIC no se ha podido detectar por estar en desventaja competitiva. El resultado sugiere una alta concentración del patógeno.
Resultado:
La señal del CHIC en el canal HEX es plana (línea verde) y la del patógeno también (línea azul).
Interpretación:
Resultado inválido.
Esto indica una inhibición total de la reacción de amplificación y por tanto el resultado no es aceptable.